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: 225-226&&&&DOI:
糖化血红蛋白微柱快速测定法探讨
宋美芳，刘泽民，贺伯明
上海医科大学妇产科医院
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微柱法测定糖化血红蛋白及其临床应用
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3秒自动关闭窗口临床检验检测HbA1c的临床意义_检验技师
【提要：临床,检验,检测,HbA1c,意义,技师,临床,检验,检测,】临床检验检测HbA1c的临床意义_检验技师
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&&&&&&&&&&&&&&&&& 检测hba1c的临床意义：目前hplc法测定hba1c使其准确性和重复性得到很大的提高。
　　糖化血红蛋白hba1c作为糖尿病筛选、诊断、血糖控制、疗效考核的有效检测指标，在临床中得到了广泛的使用，其理由有二个：目前hplc法测定hba1c使其准确性和重复性得到很大的提高。
　　1.在糖尿病的筛选普查中有早期提示的价值，可作为轻症、2型、&隐性&糖尿病的早期诊断指标。魁网(www．kui.cc)
　　2.在糖尿病的治疗中，hba1c是评价血糖控制好坏的重要标准。
　　3.预示微、小血管并发症，估价糖尿病慢性并发症的发生与发展情况。糖化血红蛋白的几种不同检测方法测定ghb主要是利用ghb和hb的物理化学性质的不同而进行的，目前主要的检测方法有5种：离子交换高效液相色谱分析法-检测糖化血红蛋白hba1c的金标准基于hbb链n末端缬氨酸糖化后所带电荷不同而建立。在中性ph条件下，hba1c携带的正电荷相对较少，因此可通过hplc法将其与其它组分（hba1c，hba1b，hba1a，hbf，hba0）区分开，得到分离。此方法曾应用于美国dcct的研究，是目前检测hba1c的金标准。（2）微柱法微柱内的阳离子交换树脂（如biorex70）在ph近7时解离后带阴电荷，而hb解离后带阳电荷，二者可形成离子键。由于ghb的阳电荷比hba少，与树脂的结合力相对低，容易被洗脱。用分光光度计分别测定洗脱液中ghb和溶血物中总hb的吸光率（a），可计算出ghb占总hb的百分比（%）。
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微柱法测定血清糖化血红蛋白及其临床意义
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&&目​的​ ​探​讨​血​清​糖​化​血​红​蛋​白​(​G​H​b​)​在​糖​尿​病​监​测​中​的​临​床​应​用​。​方​法​ ​利​用​离​子​交​换​微​柱​法​分​离​糖​尿​病​组​和​健​康​对​照​组​血​清​中​的​G​H​b​,​并​测​定​其​在​总​H​b​中​所​占​的​百​分​比​。​结​果​糖​尿​病​组​血​清​G​H​b​含​量​(​%​)​与​健​康​对​照​组​比​较​,​G​H​b​含​量​明​显​升​高​,​差​异​有​统​计​学​意​义​(​P​〈.0)​;​并​且​糖​尿​病​患​者​血​中​G​H​b​含​量​与​受​控​制​时​间​有​关​,​受​控​制​约周​后​其​血​清​G​H​b​含​量​与​健​康​对​照​组​比​较​,​差​异​无​统​计​学​意​义​(​P​〉
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糖化血红蛋白仪
近年来糖化血红蛋白（HbA1c）正日益受到临床的高度重视，糖化血红蛋白（HbA1c)是血红蛋白A组分的某些特殊分子部位和葡萄糖经过缓慢而不可逆的非酶促反应结合而形成的，当血液中葡萄糖浓度较高时，人体成的糖化血红蛋白含量也会相对较高。人体内的寿命一般为120天，在红细胞死亡前，血液中糖化血红蛋白含量也会保持相对不变。
糖化血红蛋白仪糖化血红蛋白
糖尿病是一组病因和发病机制尚未完全明了的内分泌代谢性疾病，目前发病率仅次于心脑血管疾病和肿瘤在我国糖尿病发病率为2-3%，并以每千分之一的速度增长。目前临床已广泛开展检测患者血糖工作。但血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。
因此糖化血红蛋白水平反映的是在检测前120天内的平均血糖水平，而与抽血时间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等因素无关，是判定糖尿病长期控制的良好指标。它反映4～8周的体内血糖的平均水平，并可能是造成糖尿病并发症的一个重要原因。
糖化血红蛋白的测定结果以百分率表示，指的是和葡萄糖结合的血红蛋白占全部血红蛋白的比例。非糖尿病患者的糖化血红蛋白的水平为4-6%；许多研究发现，糖尿病患者如果能将糖化血红蛋白水平降低至8%以下,糖尿病的并发症将大大降低。如果糖化血红蛋白&9%，说明患者持续性高血糖，会发生，动脉硬化，白内障等并发症，并有可能出现等急性合并症。因此，专家建议，如果糖尿病患者血糖控制已达标准，并且血糖控制状态较为平稳，每年至少应该接受2次糖化血红蛋白检测；对于那些需要改变治疗方案，或者血糖控制状态不稳定的患者，及正在进行治疗的患者，应该每三个月进行一次糖化血红蛋白测定。
糖化血红蛋白的检测可以指导临床更好地制定糖尿病患者的诊疗方案。如果某位患者每天仅在早餐前测定，发现这个值为130mg/ml，处于正常范围内；但再检测糖化血红蛋白却发现为11%，这意味着该患者在过去的3个月内，平均血糖水平已接近270mg/ml，暗示其将来发生的危险性非常高。尽管早餐前血糖结果尚满意，但是一天其它时间的血糖水平却严重超标，需要对患者饮食，运动及药物治疗作出重新评估，并作出相应调整，此外患者还需较现在更为频繁地测定血糖。
糖化血红蛋白仪检测方法
糖化血红蛋白检测方法很多，常用的有微柱法离子交换层析、亲和层析、高压液相、免疫凝集、离子捕获法、电泳法等。
糖化血红蛋白仪离子交换层析
分手工和仪器两种。手工微柱操作受到人工因互影响，可能会洗脱不完全或过度洗脱，并受外界环境温度的影响，而某些红蛋白如HbF异常增加时，也会与糖化血红蛋白同时洗脱肉而使结果产生偏差。采用微柱法离子交换层析和梯度洗脱胎技术可分离血红蛋白的变异体与亚型，除可测定糖化血红蛋白外，还可同时检测出HbS与HbC的存在与否，在计算糖化血红蛋白值时扣除变异体产生和影响，从而使结果更为准确、可靠，CV值小于2%。同时仪器配有专门的稀释溶血器，可直接进行全血操作，5分钟即可报告结果，并储存样品的检测结果，层析柱价格也较为低廉。适合于较多标本的医院检测。更大型的仪器除可测定糖化血红蛋白外，还可分离检测血红蛋白的600多种子变异体和亚型，用于等疾病的诊断。
糖化血红蛋白仪亲和层析
是目前糖化血红蛋白检测的新方法，该方法特异性强，不受异常血畿蛋白的干扰。英国日前刚刚获得美国仪器药品管理署(FDA)的认可获准上市，作为目前世界唯一的快速床边糖化血红蛋白仪，它彩硼酸亲和层析法，只需10ul全血即可在4分钟内快速分离检测糖果化血红蛋白，为临床提供即时的化验结果，从而使医生在患者就诊的第一时间明确诊断并制定相应的治疗方案，特别适合于临床科室使用，尤其对小儿患者而言更有优势。其检测结果也完全达到并超过临床要求，CV值5%以内。
糖化血红蛋白仪高压液相方法
仪器可全分离测定糖化血红蛋白及血蛋白的变异体和亚型，优点是检测速度快，精度高，CV值小于1%。是目前世界上公认的糖化血红蛋白检测的金标准。仪器保养简单，价格相对低廉，操纵性能强。 在糖化血红蛋白领域具有一定权威性。
糖化血红蛋白仪免疫凝集法
原理是糖化血红蛋白与相应的单抗结合进而发生，通过测定吸光度来表示凝集量，可用于全生化分析仪上进行测定。专用的仪器要求对样品成批试验。每次试验均应使用一个新试剂盒，操作前应注意混匀试剂。指出的是免疫凝集法测定糖化血红蛋白，精密度较差，CV值一般大小6%。
糖化血红蛋白仪离子捕获法
亦是新近发展起来的新方法，其原理是糖化血红蛋白与相应抗体结合后，联以荧光标记物，而在IMX反应孔中的玻璃纤维预先包被了高分子的四胺合物，使纤维表面带正电，使前述的反应复合物吸附在纤维表面，经过一系列的清洗后测定其荧光强度，从而得到糖化血红蛋白的浓度，该方法适用于成批糖化血红蛋白标本的检测。
糖化血红蛋白仪电泳方法
如毛细管电泳也能分离检测糖化血红蛋白和血红蛋白质的变异体，但目前尚无商品化，具有批量样本通过能力的仪器面世，相当程度地限制了该方法的临床应用。
金标法的糖化血红蛋白仪,CV值小于5%。
综上所述，糖化血红蛋白是糖尿病患者疾病控制程度一项良好的指标，糖尿病患者应定期检测糖化血红蛋白，并据此制定，修正相关治疗方案。各医院可根据自身标本的多少，选择使用有关糖化血红蛋白的检测仪器，开展该项目的检测。
糖化血红蛋白仪检测意义
糖化血红蛋白仪HbA1c的测定
可协助判断预后糖尿病合并视网膜病的病人，其HbA1c为8%-10%，表示病变中等程度，可用激光进行治疗；若大于10%则为严重病损，预后差。对妊娠性糖尿病，判断是否致畸、死胎和则更有意义，故测定HbA1c是控制的重要参数。
糖化血红蛋白仪糖尿病的诊断
健康人HbA1c为4.0%-7.7%(6.5±1.5%), 未控制的DM病人HbA1c可高达10%-20%；随机检测HbA1c，若9%，预报糖尿病的标准度约为78%，灵敏度为68%，特异性94%；HbA1c&10%，则有80%以上为糖尿病，灵敏度43%，特异性99%，有效率86%。所以，目前并不主张单独用HbA1c来诊断糖尿病，原因是精确度不高，有时造成临床解释困难。
糖化血红蛋白仪掌握控制程度
血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。
糖化血红蛋白仪控制的评价指标
作为糖尿病患者长期血糖控制的评价指标；糖化血红蛋白（HbA1c）的测定目的在于消除波动的血糖对病情的控制观察的影响，因而对血糖波动较大的Ⅰ型糖尿病患者，测定糖化血红蛋白（HbA1c）是一个有价值的血糖控制指标。对于2型糖尿病患者，血糖和尿糖测定较简单和经济，且能较可靠地反映病情的控制，故测定糖化血红蛋白（HbA1c）的意义低于1型患者，但可作为辅助检查，用于判定口服药是否失效而须用治疗。
糖化血红蛋白仪应用
糖尿病是一组病因和发病机制尚未完全明了的内分泌代谢性疾病，目前临床已广泛开展检测患者血糖工作。但血糖测定只能代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。因此糖化血红蛋白水平反映的是在检测前120天的平均血糖水平，与抽血时间，病人是否空腹，是否使用胰岛素等无关，是判定糖尿病长期控制的良好指标。糖化血红蛋白仪就是用来检测糖化血红蛋白含量的仪器。它的应用很广泛：
第一，用于糖尿病的诊断：健康人的HbA1c为4.0%-7.7%, 未控制的DM病人HbA1c可高达10%-20%；随机检测HbA1c，若9%，预报糖尿病的标准度约为78%，灵敏度为68%，特异性94%；HbA1c&10%，表示有80%以上为糖尿病，灵敏度43%，特异性99%，有效率86%。所以，目前并不主张单独用HbA1c来诊断糖尿病，原因是精确度不高。
第二，对HbA1c的测定：可协助判断预后糖尿病合并视网膜病的病人，其HbA1c为8%-10%，表示病变中等程度，可用激光进行治疗；若大于10%则为严重病损，预后差。对妊娠性糖尿病，判断是否致畸、死胎和子痫前期则更有意义，故测定HbA1c是妊娠糖尿病控制的重要参数。
第三，有助于糖尿病慢性并发症的认识：血糖测定只代表即刻的血糖水平，提示患者当时的身体状况，并不能作为评价疾病控制程度的指标。
第四，是血糖控制的评价指标：作为糖尿病患者长期血糖控制的评价指标；糖化血红蛋白（HbA1c）的测定目的在于消除波动的血糖对病情的控制观察的影响，因而对血糖波动较大的Ⅰ型糖尿病患者，测定糖化血红蛋白（HbA1c）是一个有价值的血糖控制指标。对于2型糖尿病患者，可作为辅助检查，用于判定口服药是否失效而须用胰岛素治疗。}