免疫标记技术： CK20(+), villin(+), CDX-2(+), CK7(-), Hep-1(-), CK19(-)

点击联系发帖人 时间：2018-12-17 01:13
免疫标记技术
摘　要：背景与目的：RNA干扰（RNA interferenceRNAi）是指双链RNA导入细胞后诱导靶mRNA发生特异性的降解，导致基因转录后沉默的现象RNAi在基因功能和抗病毒基凶治疗等方面均有报道。但对喉癌等头颈恶性肿瘤中高表达的人端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA建立人喉癌Hep-2细胞株裸鼠皮下接种模型。将pshRNA转染入荷瘤裸鼠瘤体内观察肿瘤生长情况。以激光共聚焦显微镜观察质粒在瘤组织内的表达：以HE染色法观察质粒治疗后瘤组织的病理改变：以原位末端标记法（TUNEL法）检测肿瘤细胞的凋亡情况：以免疫组化SP法检测hTERT蛋白在肿瘤内的表达：光镜下观察心、肝、肾、脾结构的改变并测量血液学和血液生化指标结果：pshRNA组（A组）、空质粒载体组（B组）与生理盐水组（C组）之间比较，A组与C组瘤体积有显著性差异（P〈0．01）B组與C组之间瘤体积无显著性差异（P〉0．05）．抑瘤率为76．50％。pshRNA及空质粒载体转染入瘤体后．共聚焦显微镜下见大量的癌细胞表达绿色荧光病悝学检查及TUNEL检测发现：A组肿瘤生长受到抑制，细胞分裂相少见．可见大量肿瘤细胞坏死及凋广该组肿瘤细胞的凋亡指数[（26．47±4．25）％]明顯高于B组[（3．40±1．41）％]和C组[（2．73±1．35）％]。给予pshRNA后瘤体内hTERT蛋白表达明显下调而且对心、肝、肾、脾无明显损害，对造血系统无影响结論：表达shRNA的DNA载体质粒沉默hTERT基因可显著抑制人喉癌裸鼠肿瘤的生长，而且对心、肝、肾、脾及造?
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