【摘要】:目的建立一种快速、靈敏的超高效液相色谱法,同时测定动物性食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2、M_1和M_2方法甲醇-水(80∶20,V/V)提取粉碎或匀浆动物性食品中的黄曲霉毒素,取部分樣液经过免疫亲和柱层析净化,经C_(18)色谱柱(3.0 mm×50 mm,1.7μm)分离,荧光检测器检测。保留时间定性,峰面积定量结果5 7~0.999 9之间。不同浓度水平6种黄曲霉毒素平均加标回收率在73.2%~94.1%之间,精密度在0.2%~3.8%之间结论该方法可同时、快速、高效、准确测定动物性食品中6种黄曲霉毒素的含量。
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【摘要】:该文简介免疫亲和层析柱工作原理,载体要求与选择,免疫亲和柱制备与使用,重点综述免疫亲和层析柱在黄曲霉毒素,赭曲霉毒素,玉米赤霉烯酮,脱氧雪腐镰刀菌烯醇,伏马毒素,T-2毒素等真菌毒素检测中应用最新进展
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T2毒素(T2)是由多种镰刀菌产生的┅种霉菌毒素主要污染、、等作物及其制品,对人类及畜牧业构成了较大危害T-2毒素主要影响,肝脏肾脏,胰腺肌肉及的功能T-2毒素Φ毒后的一般临床症状为厌食、呕吐、腹泻、生长停滞、和机能障碍等。
使用T2毒素试剂盒则能够快速而准确的分析样品中T2毒素残留
本试劑盒是应用ELISA技术研发的新一代真菌毒素检测产品,操作时间短于60min能最大限度地减少操作误差和工作强度。
本试剂盒采用间接竞争ELISA方法茬酶标板微孔条上预包被T2毒素抗原,样本中T2毒素和此T2毒素抗体同时T2毒素抗体与酶标二抗相结合,经TMB底物显色样本吸光值与其含有的T2毒素成负相关,与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数即可得出样品中T2毒素的含量。
可定性、定量检测玉米、大米、豆类、、燕麦、等樣本中的T2毒素
1、将所需试剂从冷藏环境中取出,置于室温(20~25℃)平衡30min以上注意每种液体试剂使用前均须摇匀。
2、取出需要数量的微孔板将不用的微孔板放进原锡箔袋中并且与提供的干燥剂一起重新密封,保存于2~8℃不要冷冻。
3、洗涤工作液在使用前也需回温
4、編号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行并记录标准孔和样本孔所在的位置。
5、加标准品/样本:加标准品/樣本50l到对应的微孔中加入T2毒素酶标物50l/孔,再加入T2毒素抗试剂50l/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境中反应30min
6、洗板:小心揭开盖板膜,将孔内液体甩干用洗涤工作液300l/孔,充分洗涤5次每次间隔30s,用吸水纸拍干(拍干后未被清除的气泡可用未使用过的枪头戳破)
7、显色:加入底物液A液50l/孔,再加底物液B液50l/孔轻轻振荡混匀,用盖板膜盖板后置室温避光环境反应15~20min
8、测定:加入终止液50l/孔,轻輕振荡混匀设定酶标仪于450nm处(建议用双波长450/630nm检测,请在5min内读完数据)测定每孔OD值。(若无酶标仪则不加终止液用目测法可进行判定)。
檢测方法灵敏度、准确度、精密度
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