不同倍率物镜倍率下的图像有什么区别?

显微镜放大倍率的极限即有效放夶倍率显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两个物点的最小间距。分辨率和放大倍率是两个不同的但又相互有联系今天小编就帶大家聊聊显微镜放大倍率和分辨率之间的关系?

光学显微镜当选用的物镜倍率数值孔径不够大即分辨率不够高时,显微镜不能分清物體的微细结构此时即使过度地增大放大倍率,得到的也只能是一个轮廓虽大但细节不清的图像称为无效放大倍率。反之如果分辨率已滿足要求而放大倍率不足则显微镜虽已具备分辨的能力,但因图像太小而仍然不能被人眼清晰视见所以为了充分发挥显微镜的分辨能仂,应使数值孔径与显微镜总放大倍率合理匹配

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光学显微镜一般由载物台、聚光照明系统、物镜倍率目镜和调焦机构组成。载物台用于承放被观察的物体利用调焦旋钮可以驱动调焦机构,使载物台作粗调和微调的升降运动使被观察物体调焦清晰成象。它的上层可以在水平面内沿作精密移动和转动一般都把被观察的部位调放到视场中心。

聚光照奣系统由灯源和聚光镜构成聚光镜的功能是使更多的光能集中到被观察的部位。照明灯的光谱特性必须与显微镜的接收器的工作波段相適应

物镜倍率位于被观察物体附近,是实现第一级放大的镜头在物镜倍率转换器上同时装着几个不同放大倍率的物镜倍率,转动转换器就可让不同倍率的物镜倍率进入工作光路物镜倍率的放大倍率通常为5~100倍。

物镜倍率是显微镜中对成象质量优劣起决定性作用的光学え件常用的有能对两种颜色的光线校正色差的消色差物镜倍率;质量更高的还有能对三种色光校正色差的复消色差物镜倍率;能保证物鏡倍率的整个像面为平面,以提高视场边缘成像质量的平像场物镜倍率高倍物镜倍率中多采用浸液物镜倍率,即在物镜倍率的下表面和標本片的上表面之间填充折射率为1.5左右的液体它能显著的提高显微观察的分辨率。

目镜是位于人眼附近实现第二级放大的镜头镜放大倍率通常为5~20倍。按照所能看到的视场大小目镜可分为视场较小的普通目镜,和视场较大的大视场目镜(或称广角目镜)两类

载物台和物鏡倍率两者必须能沿物镜倍率光轴方向作相对运动以实现调焦,获得清晰的图像用高倍物镜倍率工作时,容许的调焦范围往往小于微米所以显微镜必须具备极为精密的微动调焦机构。

显微镜放大倍率的极限即有效放大倍率显微镜的分辨率是指能被显微镜清晰区分的两個物点的最小间距。分辨率和放大倍率是两个不同的但又互有联系的概念

当选用的物镜倍率数值孔径不够大,即分辨率不够高时显微鏡不能分清物体的微细结构,此时即使过度地增大放大倍率得到的也只能是一个轮廓虽大但细节不清的图像,称为无效放大倍率反之洳果分辨率已满足要求而放大倍率不足,则显微镜虽已具备分辨的能力但因图像太小而仍然不能被人眼清晰视见。所以为了充分发挥显微镜的分辨能力应使数值孔径与显微镜总放大倍率合理匹配。

聚光照明系统是对显微镜成像性能有较大影响但又是易于被使用者忽视嘚环节。它的功能是提供亮度足够且均匀的物面照明聚光镜发来的光束应能保证充满物镜倍率孔径角,否则就不能充分利用物镜倍率所能达到的最高分辨率为此目的,在聚光镜中设有类似照相物镜倍率中的 可以调节开孔大小的可变孔径光阑,用来调节照明光束孔径鉯与物镜倍率孔径角匹配。

改变照明方式可以获得亮背景上的暗物点(称亮视场照明)或暗背景上的亮物点(称暗视场照明)等不同的观察方式,以便在不同情况下更好地发现和观察微细结构

电子显微镜是根据电子光学原理,用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜使物质的細微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。

电子显微镜的分辨能力以它所能分辨的相邻两点的最小间距来表示20世纪70年代,透射式电子顯微镜的分辨率约为0.3纳米(人眼的分辨本领约为0.1毫米)现在电子显微镜最大放大倍率超过300万倍,而光学显微镜的最大放大倍率约为2000倍所以通过电子显微镜就能直接观察到某些重金属的原子和晶体中排列整齐的原子点阵。

1931年德国的克诺尔和鲁斯卡,用冷阴极放电电子源和三個电子透镜改装了一台高压示波器并获得了放大十几倍的图象,证实了电子显微镜放大成像的可能性1932年,经过鲁斯卡的改进电子显微镜的分辨能力达到了50纳米,约为当时光学显微镜分辨本领的十倍于是电子显微镜开始受到人们的重视。

到了二十世纪40年代美国的希爾用消像散器补偿电子透镜的旋转不对称性,使电子显微镜的分辨本领有了新的突破逐步达到了现代水平。在中国1958年研制成功透射式電子显微镜,其分辨本领为3纳米1979年又制成分辨本领为0.3纳米的大型电子显微镜。

电子显微镜的分辨本领虽已远胜于光学显微镜但电子显微镜因需在真空条件下工作,所以很难观察活的生物而且电子束的照射也会使生物样品受到辐照损伤。其他的问题如电子枪亮度和电孓透镜质量的提高等问题也有待继续研究。

分辨能力是电子显微镜的重要指标它与透过样品的电子束入射锥角和波长有关。可见光的波長约为300~700纳米而电子束的波长与加速电压有关。当加速电压为50~100千伏时电子束波长约为0.0053~0.0037纳米。由于电子束的波长远远小于可见光的波长所以即使电子束的锥角仅为光学显微镜的1%,电子显微镜的分辨本领仍远远优于光学显微镜

电子显微镜由镜筒、真空系统和电源櫃三部分组成。镜筒主要有电子枪、电子透镜、样品架、荧光屏和照相机构等部件这些部件通常是自上而下地装配成一个柱体;真空系統由机械真空泵、扩散泵和真空阀门等构成,并通过抽气管道与镜筒相联接;电源柜由高压发生器、励磁电流稳流器和各种调节控制单元組成

电子透镜是电子显微镜镜筒中最重要的部件,它用一个对称于镜筒轴线的空间电场或磁场使电子轨迹向轴线弯曲形成聚焦其作用與玻璃凸透镜使光束聚焦的作用相似,所以称为电子透镜现代电子显微镜大多采用电磁透镜,由很稳定的直流励磁电流通过带极靴的线圈产生的强磁场使电子聚焦

电子枪是由钨丝热阴极、栅极和阴极构成的部件。它能发射并形成速度均匀的电子束所以加速电压的稳定喥要求不低于万分之一。

电子显微镜按结构和用途可分为透射式电子显微镜、扫描式电子显微镜、反射式电子显微镜和发射式电子显微镜等透射式电子显微镜常用于观察那些用普通显微镜所不能分辨的细微物质结构;扫描式电子显微镜主要用于观察固体表面的形貌,也能與 X射线衍射仪或电子能谱仪相结合构成电子微探针,用于物质成分分析;发射式电子显微镜用于自发射电子表面的研究

投射式电子显微镜因电子束穿透样品后,再用电子透镜成像放大而得名它的光路与光学显微镜相仿。在这种电子显微镜中图像细节的对比度是由样品的原子对电子束的散射形成的。样品较薄或密度较低的部分电子束散射较少,这样就有较多的电子通过物镜倍率光栏参与成像,在圖像中显得较亮反之,样品中较厚或较密的部分在图像中则显得较暗。如果样品太厚或过密则像的对比度就会恶化,甚至会因吸收電子束的能量而被损伤或破坏

透射式电子显微镜镜筒的顶部是电子枪,电子由钨丝热阴极发射出、通过第一第二两个聚光镜使电子束聚焦。电子束通过样品后由物镜倍率成像于中间镜上再通过中间镜和投影镜逐级放大,成像于荧光屏或照相干版上

中间镜主要通过对勵磁电流的调节,放大倍数可从几十倍连续地变化到几十万倍;改变中间镜的焦距即可在同一样品的微小部位上得到电子显微像和电子衍射图像。为了能研究较厚的金属切片样品法国杜洛斯电子光学实验室研制出加速电压为3500千伏的超高压电子显微镜。

扫描式电子显微镜嘚电子束不穿过样品仅在样品表面扫描激发出次级电子。放在样品旁的闪烁晶体接收这些次级电子通过放大后调制显像管的电子束强喥,从而改变显像管荧光屏上的亮度显像管的偏转线圈与样品表面上的电子束保持同步扫描,这样显像管的荧光屏就显示出样品表面的形貌图像这与工业电视机的工作原理相类似。

扫描式电子显微镜的分辨率主要决定于样品表面上电子束的直径放大倍数是显像管上扫描幅度与样品上扫描幅度之比,可从几十倍连续地变化到几十万倍扫描式电子显微镜不需要很薄的样品;图像有很强的立体感;能利用電子束与物质相互作用而产生的次级电子、吸收电子和 X射线等信息分析物质成分。

扫描式电子显微镜的电子枪和聚光镜与透射式电子显微鏡的大致相同但是为了使电子束更细,在聚光镜下又增加了物镜倍率和消像散器在物镜倍率内部还装有两组互相垂直的扫描线圈。物鏡倍率下面的样品室内装有可以移动、转动和倾斜的样品台

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