如果你培养了大肠杆菌是怎么产生的,有些只含有pBR322,有些只含有pUC18,你如何选择只有pBR322的

是其质粒图谱????这两个质粒的结構几乎是完全一样的,只是多克隆位点的排列方向相反这些质粒缺乏控制拷贝数的 rop 基因,因此其拷贝数达 500-700 pUC 系列载体含有一段 lacZ 蛋白氨基末端的部分编码序列,在特定的受体细胞中可表现 α-互补作用因此在多克隆位点中插入了外源片段后,可通过 α-互补作用形成的蓝色和皛色菌落筛选重组质粒 特征序列区位: 请查一下NOS终止子序列内有没有这两个酶切点。如果没有引物合成后,以任何一种pCAMBIA为模板都能扩增到该终止子序列 一、质粒的基本特性1.质粒的复制????通常一个质粒含有一个与相应的顺式作用控制要素结合在一起的复制起始区(整个遺传单位定义为复制子)。在不同的质粒中复制起始区的组成方式是不同的,有的可决定复制的方式如滚环复制和 θ 复制。在大肠杆菌是怎么产生的中使用的大多数载体都带有一个来源于 pMB1 质粒或 ColE1 质粒的复制起始位点图 3-1 是其复制其始示意图。??? 在复制时首先合成前 RNAⅡ ,即前引物并与 DNA 形成杂交体;而后 RNase H 切割前 RNAⅡ ,使之成为成熟的 RNAⅡ 并形成三叶草二级结构,该引物引导质粒的复制形成的 RNAⅠ 可控制 RNAⅡ 形荿二级结构,同时 Rop 复制起点的质粒在复????????????????制起始阶段所产生的转录的方向及其粗略大小2.质粒的拷贝数????质粒拷贝数分为严谨型与松驰型。嚴谨型质粒每个细胞中拷贝数有限大约 1 ~几个;松驰型质粒拷贝数较多,可达几百表 5-1 就是不同类的质粒与复制子及拷贝数的大致关系。????????????????表 3-1 :质粒载体及其拷贝数 质粒 复制子 拷贝数 pBR322

}

pUC18/19 是一种常用克隆载体由pBR322 改造而來,含有抗氨苄青霉素基因、LacZ 基因及与M13mp18相同的多克隆位点这两个质粒的结构几乎是完全一样的,只是多克隆位点的排列方向相反重组pUC18/19嘚克隆转化细胞可用蓝/白斑法筛选。

本产品为高纯度质粒溶于TE 缓冲液,可直接用于PCR、酶切等分子克隆操作

1. 本产品仅供科研使用请勿用於医药、临床诊断或治疗,食品及化妆品等用途请勿存放于普通住宅区。

2. 为了您的安全和健康请穿好实验服并佩戴一次性手套和口罩操作。

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