如何从鱿鱼油中提取胆固醇

我现茬在做这方面的提取工作由于按以前的老工艺一直做不出来，请大家帮忙谢谢！！！

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  1 主题内容与适用范围
   本标准规定了用分光光喥计测定各类动物性食品中胆固醇的方法。
   本标准适用于各类动物性食品中胆固醇的测定
   当固醇类化合物与酸作用时，可脱水并发生聚匼反应产生颜色物质。
   因此可先
  对食品样品进行提取和皂化用硫酸铁铵试剂作为显色剂，测定食品胆固醇的含量
   全部试剂除注明外均为分析纯，试验用水为蒸馏水
  3。4 冰乙酸：优级纯
   
  3。6 胆固醇标准物质
  3。7 胆固醇标准液
  3。71 胆固醇标准储备液（1mg/mL）：精确称取胆固醇100mg，溶于冰乙酸中并定
  容至100mL。此液至少在2个月内保持稳定
  3。72 胆固醇标准常备液（100(g/mL）：吸取胆固醇标准储备液10mL，用冰乙酸定
  容至100mL
   此液用时临时配制。
  贮于干燥器内此液在室温中稳定。
  38。2 铁钒显色液：吸取铁钒储备液10mL用浓硫酸定容至100mL。
   贮于干燥器内
  3。9 50％氢氧化鉀溶液：称取50g氢氧化钾用蒸馏水溶解，并稀释至100mL
  3。10 5％氯化钠溶液：称取5g氯化钠用蒸馏水溶解，并稀释至100mL
  3。11 钢瓶氮气：纯度9999％。
   
  41 实验室常用设备。
  42 721型分光光度计。
  43 电热恒温水浴。
   吸取胆固醇标准常备液0
   0、0。5、10、1。5、20mL分别置于10mL试管内，在各
  管内加入冰乙酸使总体积皆达4mL沿管壁加入2mL铁钒显色液，混匀在15～90min
  内，在560～575nm波长下比色以胆固醇标准浓度为横坐标， 吸光度之为纵坐标做
  52。1 食品脂肪的提取与测定
   根据食品种类分别用索氏脂肪提取法、研磨浸提法和罗高氏法提取脂肪 并计
  算出每100g食品中的脂肪含量。
  52。2 食品胆固醇的测定
   将提取的油脂3～4滴（约含胆固醇300～500mg ）置于25mL试管内，准确记录其重量
   加入4mL无水乙醇，05mL50%氢氧化钾溶液，在65℃恒温水浴中皂化1h皂化时每隔20～30min振荡一次使皂化完全。皂化完毕取出试管，冷却加入3mL5％氯化钠溶液，10mL石油醚盖紧玻塞，在电动振荡器上振摇2min 静置分層（一般
   取上层石油醚液2mL，置于10mL具玻塞试管内在65℃水浴中用氮气吹干，加入
  4mL冰乙酸2mL铁钒显色液，混匀放置15min后在560～575nm波长下比色，测得吸光度在标准曲线上查出相应的胆固醇含量。
   X＝———————— ×————
  式中： X—样品中胆固醇含量mg/100g；
   m—测得的吸光度值在胆固醇标准线上显示的胆固醇含量，mg ；
   V—石油醚总体积mL；
   v1—取出的石油醚体积，mL；
   m1—称取食品油脂样品量g；
   c—食品样品油脂含量，g/100g；
   1/1000—折算成每100g食品中胆固醇毫克数
   
   同一实验室同时或连续两次测定结果之差不得超过平均值的10％。
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   注：表中每个值均为三个测定值的平均值。