冰冻切片包埋步骤免疫荧光染色鋶程
用组化油笔将待染组织圈好置
封片后,荧光显微镜观察结果并拍照;
个视野计数阳性细胞数
)整个实验过程中勿使表面干燥
)稀釋、加二抗(荧光抗体)及此后的洗涤过程中注意避光
:如目的分子为胞内分子,各种液体中需要加透膜剂
:所用液体(表面分子染色不鼡
1. 将放在蔗糖溶液中的组织块取出放入20g L-1 蔗糖与OCT包埋剂1:1体积比例混合液中,室温浸泡2h 2. 移入OCT包埋剂中室温浸泡4h更换新的OCT包埋剂,室温浸泡6h. 3. 将标本置于托物台用恒冷箱切片机切片(一般-22℃),片厚10μm贴于预处理的载玻片上,-20℃冰箱保存 冰冻切片包埋步骤包埋剂是一种聚乙二醇和聚乙烯醇嘚水溶性混合物,目前已广泛用于免疫组化实验室中其用途是在冰冻切片包埋步骤时支撑组织,以增加组织的连续性减少皱折及碎裂。 又因OCT混合物为水溶性故在漂片时可溶于水,所以在以后的染色中不会增加背景染色 |
版权声明:文章内容来源于网络,版权归原作者所有,如有侵权请点击这里与我们联系,我们将及时删除。