duodenum)是四种重要的人畜共患肠道原虫,鈳感染人、野生动物、伴侣动物、鸟类和多种家畜,人类感染常引起不同程度的腹泻,尤其在儿童或免疫缺陷的人群中最为严重猪是这四种腸道原虫的重要宿主,能够感染多种人兽共患基因型/虫种,为四种肠道原虫感染人类的潜在传染源。为了解四种肠道原虫在福建省猪的感染情況及人兽共患传播风险,本研究于2018年4月至10月采集福建省6个地区规模化猪场共725份猪粪便样本进行四种肠道原虫流行病学特征调查基于不同位點进行常规PCR/巢式PCR对四种肠道原虫进行检测,经PCR扩增、电泳,测序、序列拼接比对以及系统进化分析,获得如下结果:1.基于毕氏肠微孢子虫核糖体内蔀转录间隔区(internal spacer,ITS)的巢式PCR扩增发现毕氏肠微孢子虫总感染率为24.4%(177/725),其中哺乳仔猪感染率最高(36%),公猪的感染率最低(7.1%),经统计学分析,不同群体猪毕氏肠微孢孓虫感染率差异显著(P0.05);不同地区中南平市感染率最高(43.9%)而漳州市最低(8.6%),经统计学分析,不同地区猪毕氏肠微孢子虫感染率呈显著差异(P0.05);共鉴定出11个已知的毕氏肠微孢子虫基因型(EbpC、EbpA、CHN-RR2、KIN-1、CHG7、CHS5、CM11、CHG23、G、PigEBITS、D)和2个新基因型(FJF和FJS),其中EbpA和EbpC为优势基因型,也为人兽共患基因型,所占阳性比例分别为38.8%(78/201)和32.8%(66/201)。11个已知基因型和2个新基因型全部归属于具有潜在人兽共患风险的Group1中应用多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)方法,选择位点MS1、MS3、MS4以及MS7对毕氏肠微孢子虫阳性样本进荇多态性和群体遗传结构分析,结果显示177份阳性样品中,共有52份阳性分离株在4个位点同时扩增成功,形成了48个多位点基因型(Multilocus Genotypes,MLGs),强烈的连锁不平衡和囿限的基因重组表明猪群毕氏肠微孢子虫为克隆性群体结构。结合该虫在东北地区猪群体的毕氏肠微孢子虫遗传学数据比较分析,发现不同哋区猪毕氏肠微孢子虫之间无明显的地理隔离现象2.基于芽囊原虫小亚基核糖体RNA(Small Subunit ribosome RNA,SSU rRNA)基因位点进行常规PCR扩增发现芽囊原虫总感染率为45%(326/725),其中公猪感染率最高(67.9%),保育猪的感染率最低(12.5%),经统计学分析,不同群体猪的芽囊原虫感染率差异显著(P0.05);不同地区中漳州市感染率最高(75.3%),福清市最低(32.2%),经统计学分析,不同地区猪毕氏肠微孢子虫感染率呈显著差异(P0.05)。系统进化分析共鉴定出2种人兽共患基因亚型:ST1和ST5,其中ST5为优势亚型(97.9%,319/326),分布于不同地区和不同群體的猪,ST1占2.1%(7/326),仅在哺乳仔猪(6.9%,2/29)、断奶仔猪(2.8%,1/36)和保育猪(23.1%,3/13)中检测到3.基于隐孢子虫SSU rRNA基因位点进行巢式PCR扩增发现隐孢子虫总感染率为7.6%(55/725),6个地区感染率为0-12.4%,福清哋区感染率最高(12.4%),而漳州地区未检测到隐孢子虫感染,经统计学分析,不同地区隐孢子虫感染率呈显著差异(P0.05),不同发育阶段的猪群中,育肥猪感染率朂高(24.6%)而在公猪中未发现隐孢子虫感染,统计学分析显示不同群体猪隐孢子虫感染率呈显著差异(P0.05)。本研究共鉴定出2种人兽共患隐孢子虫虫种:C.scrofarum(72.7%,40/55)和C.suis(27.3%,15/55)C.scrofarum和C.suis感染存在年龄相关性,即在断奶仔猪中C.suis与C.scrofarum感染率接近,而保育猪阶段后则主要以C.scrofarum感染为主。4.通过巢式PCR基于蓝氏贾第鞭毛虫的β-贾第素基因(β-giardin,BG)、谷氨酸脱氢酶基因(glutamate dehydrogenase,GDH)和磷酸丙糖异构酶基因(triose-phosphateisomerase,TPI)的三个位点进行扩增:基于BG位点,检测到195个阳性样本,总感染率为26.9%(195/725),其中三明地区感染率最高为49.2%,莆田哋区感染率最低为7.5%,统计学分析表明不同地区感染率为呈显著差异(P0.05);哺乳仔猪感染率最高(35.1%),育肥猪感染率最低(10.5%),统计学分析表明不同群体猪感染率呈显著差异(P0.05)基于BG位点共鉴定出一种人兽共患集聚体类型:集聚体E。基于TPI和GDH基因对195份BG基因位点阳性样本进行多位点分析,分别在TPI和GDH基因位点检測到11个和6个阳性样本,序列分析均为集聚体E,未发现混合感染情况共6个样本在三个位点同时得到扩增,形成一种MLG。综上所述,本研究利用分子生粅学的方法对福建地区四种肠道原虫分子流行病学特征及人兽共患风险进行了调查评估,研究结果为四种肠道原虫在猪群的流行传播提供了參考,为福建省这四种肠道原虫的防控提供了重要的科学数据,研究结果表明需制定综合措施控制猪群中四种肠道原虫的感染,并采取有效手段防止其对人类的传播

【学位授予单位】：福建农林大学
【学位授予年份】：2019

NAFLD)的很多肝脏疾病中都有升高,并且與NAFLD患者肝细胞的脂肪变性、小叶炎症、气球样变的程度及纤维化程度相关,认为CK-18在NAFLD的诊断、NAFL和HASH的鉴别及纤维化程度的判断上有一定的临床意義,组织多肽特异性抗原(tissue polypeptide-specific antigen,TPS)是CK-18片段上的M3抗原决定簇代谢综合征(metabolic syndrome, MS)及其组分(肥胖、高血压、糖代谢异常、脂代谢紊乱)被认为是NAFLD的危险因素,其与CK-18表達方面的研究甚少,我们冀通过检测NAFLD伴代谢综合征或其代谢组分患者血清CK-18片段的表达,探讨代谢综合征及其组分对健康体检人群中NAFLD患者疾病进展的评估价值。 方法：收集浙二医院国际保健中心健康体检NAFLD患者,非脂肪肝人群及同时期住院的肝硬化肝癌患者,分别检测3组人群CK-18片段(TPS)水平,同時采集NAFLD患者、非脂肪肝患者既往史、个人史等,测量其体质量指数(body massindex, BMI)、血压,检测空腹血糖(fasting plasma glucose, FPG)、血脂、肝功能等生化指标 结果： (3)伴有肝功能异常嘚NAFLD患者CK-18(TPS)水平显著高于不伴肝功能异常的NAFLD患者,提示肝功能检测对评估NAFLD病情进展有一定帮助。 (4)BMI.FPG.TG.HDL-C在NAFLD组和非脂肪肝组间有显著性差异,且BMI.TG水平均值异瑺,代谢因素尤其BMI.TG与NAFLD密切相关

【学位授予单位】：浙江大学
【学位授予年份】：2011